尿嘧啶DNA糖基酶(UDG/UNG)

中文名称：尿嘧啶DNA糖基酶(UDG/UNG)
英文名称：Uracil-DNA Glycosylase;Uracil N-Glycosylase
产品规格：1000U|5000U
本制品为来源于E. coli uracil N-glycosylase基因的重组表达蛋白，分子量为26kDa。它可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶，但对RNA无活性。 UNG主要应用于PCR扩增产物的防污染，作用原理基为：如果在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中，形成了含dU碱基的PCR扩增产物，该酶能选择性断裂单链和双链DNA中U基的糖苷键，降解该PCR扩增产物。

产品应用：
· 去除单链或双链DNA中的尿嘧啶碱基
· 去除PCR残存污染

产品组成：

储存条件：-20℃，可保存2年，避免反复冻融。

活性测试：

取1μg dUTP PCR产物，用UNG 37℃消化30min后进行琼脂糖凝胶电泳。
泳道1：对照（不加UNG酶）；
泳道2-7：分别为 2U、0.5U、0.125U、0.032U、0.008U、0.002U UNG酶37℃消化30min后的PCR产物；
M：DNA Marker 2000（MT0038）

性能测试：

UNG在标准PCR体系下（50μl体系）性能测试。 处理方法为：在反应体系中分别加入不同量的UNG（如图所示），50度2min，95度5min，然后进入PCR循环扩增，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳。泳道1-3：标准dNTP Mixture，UNG用量0.25U/0.5U/1U；
泳道4-6：dNTP/dUTP Mixture，UNG用量0.25U/0.5U/1U；
M：DNA Marker 10000

单位定义：在标准PCR反应体系下，37℃条件下，1小时降解1μg含dU碱基的单链DNA的酶量为一个活性单位。

反应Buffer：Uracil DNA Glycosylase (UNG)与绝大多数的PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的，但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到抑制。

贮存液：20mM Tris-HCl, 50mM NaCl, 1mM DTT, 50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。

热失活：95℃，5min。

使用举例：
1．配制反应体系：

2．PCR循环参数设置

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！