骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法、Goldner三色染色法等。Goldner三色染色又称戈德纳三色 染色，与Masson三色染色类似，三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。 Goldner三色染色液染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结 构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。该染液多用于骨类物质的染色，对细胞染 色效果较好，尤其适用于代谢性疾病(Paget病、骨性营养不良等)的研究，以评估成骨细胞和破骨细胞的活性，并容易辨认 骨髓中的转移性肿瘤细胞。

【自备材料】

1、系列乙醇

2、蒸馏水 【使用方法】

1、切片二甲苯脱蜡或脱塑料，乙醇漂洗，入水。

2、入配制好的Weigert铁苏木素染色20～30min。

3、流水冲洗1min，用酸性分化液迅速分化(一般＜5s)。

4、流水冲洗5min，蒸馏水稍洗。

5、入Acid Ponceau染色液染色5min。

6、在上述过程中按蒸馏水:弱酸溶液=4:1比例配制弱酸工作液，用弱酸工作液洗15～30s。

7、入Orange G染色液染色，直至Ponceau染色液，一般需要3～10min。

8、用配制好的弱酸工作液冲洗15～30s。

9、直接入亮绿染色液中染色5min。

10、用配制好的弱酸工作液冲洗3次，每次15s。

11、蒸馏水冲洗，吸干或晾干，无水乙醇快速脱水，中性树胶封固。

染色结果

矿化骨 绿色 类骨质 橙色-红色 软骨 紫色 细胞核 蓝色-灰色

【注意事项】

1、切片脱蜡应尽量干净。固定起着重要的作用，使用不同的固定液可延或缩短染色时间。

2、取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染液，一般24h失去染色力。

3、酸性分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。

4、弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配制0.1～1%乙酸溶液予以替代。

5、Orange G染色液染色时在镜下控制，以丽春红脱去为准。

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