本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中碱性磷酸酶(ALP)的含量。
实验原理:
  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠碱性磷酸酶(ALP)水平。用纯化的大鼠碱性磷酸酶(ALP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入碱性磷酸酶(ALP),再与HRP标记的碱性磷酸酶(ALP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的碱性磷酸酶(ALP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠碱性磷酸酶(ALP)浓度。
试剂盒组成:
| 试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 | 
| 说明书 | 1份 | 1份 |  | 
| 封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |  | 
| 密封袋 | 1个 | 1个 |  | 
| 酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2 | 
| 标准品:135U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2 | 
| 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2 | 
| 酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 | 
| 样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 | 
| 显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 | 
| 显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 | 
| 终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2 | 
| 浓缩洗涤液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2 | 
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过
