在不同实验条件下比较四种 Taq DNA Polymerase对长短DNA片段的扩增效率-自主发布-资讯-生物在线

在不同实验条件下比较四种 Taq DNA Polymerase对长短DNA片段的扩增效率

作者:江苏凯基生物技术股份有限公司 2008-11-10T00:00 (访问量:7641)

 

本报告中不同泳道中TAQ酶的来源公司:

Lane1:  国外品牌  Lane2:  国内品牌 Lane3:  KeyGen I Lane4:  KeyGen II

M: DNA Marker, DL2000

本报告中对扩增的长片段:

长片段模板DNA为pET28a-MHC I Heavy Chain ;短片段模板DNA为pET28a-β2microglobulin ;

所用引物浓度为10uM ;dNTP浓度为10mM ;

通用反应体系为:

H2O          *

10×Buffer         2.5

MgCl2          *

dNTP          0.7

up-stream primer         0.7

down-stream primer         0.7

plate DNA          1

Taq polymerase          *

Total volume          25 uL

注:1)本体系以25 uL反应体积为例,50 uL 反应体积各反应物加倍。

2)* 表示所加量根据不同反应作相应的调整。

1.    不同酶量时四种TAQ酶扩增长片段效率的比较

 

Fig.1 不同酶量时四种TAQ酶扩增长片段效率的比较

结论: 对长片段:高酶浓度时扩增效率: 酶1 = 酶3 = 酶4 > 酶2 ;

                 低酶浓度时扩增效率: 酶1 > 酶3 = 酶4 > 酶2 ;

                 对四种酶,高酶浓度的扩增效率优于低酶浓度.

2.    不同反应体积时四种TAQ酶扩增长片段效率的比较

Fig.2 不同反应体积时四种TAQ酶扩增长片段效率的比较

结论: 对长片段:25ul 和50ul反应体系时扩增效率: 酶4 > 酶3 = 酶1 > 酶2 ; 

                 对四种酶, 25ul反应体系扩增效率优于50ul反应体系.

3.    不同模板拷贝时四种TAQ酶扩增长片段效率的比较

 

Fig.3 不同模板拷贝时四种TAQ酶扩增长片段效率的比较

结论:对长片段:高模板浓度时扩增效率: 酶4 = 酶3 = 酶1 > 酶2 ;

                低模板浓度时扩增效率: 酶4 > 酶3 > 酶1 > 酶2 ;

                对四种酶,高模板浓度的扩增效率优于低模板浓度.

4.    不同酶量时四种TAQ酶扩增短片段效率的比较

 

Fig.4 不同酶量时四种TAQ酶扩增短片段效率的比较

结论:对短片段:高酶浓度时扩增效率: 酶1 = 酶3 > 酶4 = 酶2 ;

                低酶浓度时扩增效率: 酶4 > 酶3 = 酶2 = 酶1 ;

                对四种酶,高酶浓度的扩增效率优于低酶浓度.

5.    不同反应体积时四种TAQ酶扩增短片段效率的比较

Fig.5 不同反应体积时四种TAQ酶扩增短片段效率的比较

结论:对短片段:25ul 和50ul反应体系时扩增效率: 酶1 = 酶3 = 酶4 > 酶2 ; 

            对四种酶, 25ul反应体系扩增效率相似于50ul反应体系.

6.    不同模板拷贝时四种TAQ酶扩增短片段效率的比较

Fig.6 不同模板拷贝时四种TAQ酶扩增短片段效率的比较

结论:对短片段:高模板浓度时扩增效率: 酶3 > 酶4 = 酶1 = 酶2 ;

                低模板浓度时扩增效率: 酶4 > 酶1 > 酶3 > 酶2 ;

                对四种酶,高模板浓度的扩增效率优于低模板浓度.

 

 

 

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