农杆菌感受态制备试剂盒(Agrobacterium Competent Cells Preparation Kit)，是一种专门用于农杆菌感受态快速制备的试剂盒。农杆菌经过本试剂盒处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。

农杆菌常生活在植物根表面，依靠由根组织渗透出来的营养物质生存，是一类广泛存在于土壤中的革兰氏阴性细菌，常用于基因过表达、敲除、敲减和编辑等转基因植物的构建。根瘤农杆菌Ti质粒上的T-DNA上有8个左右的基因在植物细胞内表达，指导合成一种特殊化合物冠瘿碱，引起转化细胞癌变;而发根农杆菌的Ri质粒同样含有T-DNA,可诱导产生发状根，其特征是大量增生高度分支的根系。

本试剂盒适用于绝大多数常见的农杆菌，如GV3101、EHA101、LBA4404和EHA105等根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)或C58C1和Ar.1193等发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)感受态细胞的制备。使用本试剂盒可以使感受态转化效率达到10³-10⁴cfu/μg质粒。但是不同种类农杆菌菌种制备出来的感受态细胞，转化效率可能有较大差异。此外，对于较小的质粒转化效率会略高，而对于较大的质粒则转化效率会略低一些。

本试剂盒操作简单，细菌培养后仅需1个小时左右即可完成感受态细胞的制备。

本试剂盒提供了专门用于制备农杆菌感受态的培养液，使感受态的制备更加便捷。

农杆菌感受态制备试剂盒制备的农杆菌感受态转化效果参考图1。

图1. 农杆菌感受态制备试剂盒制备的农杆菌感受态转化效果图。使用本试剂盒制备的感受态在液氮中速冻后保存在-80℃。取-80℃保存的农杆菌感受态放置于室温片刻，待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰浴中。每100 μl感受态细胞加入0.1μg质粒DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置15min、液氮1-3min、37℃水浴3-5min。 然后在超净台中加入500 μl无抗生素的LB或YEB液体培养基，28℃振荡培养2h。4000×g离心1min收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬农杆菌沉淀，涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28-30℃培养箱培养2-3天。GV3101转化效果见图1A(转化效率约为3×10³ CFU/μg质粒)，LBA4404转化效果见图1B(转化效率约为1.5×10³ CFU/μg质粒)，EHA101转化效果见图1C(1×10⁴ CFU/μg质粒)。本产品的实际使用效果会因具体实验条件、实验材料等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

本试剂盒可以分多次使用，共可以制备足够进行100次转化的感受态细胞。

-20℃保存，一年有效。 利福平须避光保存。

本试剂盒中提供的利福平溶液如果出现沉淀，属于正常现象，可以在充分溶解后使用。

感受态制备的过程中须注意无菌操作，避免其它微生物的污染。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。