转染试剂
稳定转染是效应T细胞稳定表达CAR的前提。目前用于CAR-T的基因转导的方法主要有逆转录病毒转导、慢病毒转导和mRNA转染。
Mirus公司的TransIT-VirusGEN®转染试剂可提高载体转染到贴壁或悬浮HEK 293细胞的效率，并有效提高重组腺相关病毒和慢病毒的产量。除了科研级别，Mirus还推出了临床前级别的TransIT-VirusGEN® SELECT Transfection Reagent。TransIT-VirusGEN®SELECT转染试剂优于PEI和PEIpro®试剂，是临床前和早期临床试验中大规模病毒生产的理想选择。Mirus也计划推出GMP级别的TransIT-VirusGEN®转染试剂。
产品优势：
高效 — 实现高滴度病毒大规模生产中DNA高效转染
验证 — 经测试确认配方特性，无菌、低内毒素水平、无支原体
灵活 — 可与不同的重组病毒平台和细胞培养系统兼容
安全 — 完全合成的配方，无动物来源成分
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分别使用T ® ransIT-VirusGEN SELECT Transfection Reagent ® (3:1, vol:wt), 25 kDa PEI (4:1, Polysciences) 和 PEIpro (2:1, Polyplus Transfection)将第三代载体pLKO.1-puro-CMVTurboGFP™和ViraSafe™ Pantropic Packaging mix (pRSV-Rev, pCMV-VSV-G, pCgpV, Cell Bio Labs)( 3:0.5:0.5:2 DNA ratio, 1 μg/ml total plasmid DNA)转染至FreeStyle™ F17培养基中悬浮培养的FreeStyle™ 293-F细胞(A)和DMEM + 10% FBS中培养的贴壁293T/17细胞(C)生产慢病毒。用含病毒的上清液转导293T/17细胞，并在转导 ® 72小时后用Guava Easycyte™ 5HT流式细胞仪检测GFP表达情况。 |
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分别使用T ® ransIT-VirusGEN SELECT Transfection Reagent ® (2:1, vol:wt), 25 kDa PEI (2:1, Polysciences) 和 PEIpro (2:1 or 4:1, Polyplus Transfection)将pAAV-hrGFP, pAAV-RC和 pAAV Helper plasmids (1:1:1 DNA ratio, 1.5 μg/ml plasmid DNA, Agilent Technologies)转染 至FreeStyle™ F17培养基中悬浮培养的FreeStyle™ 293-F细胞(B)及DMEM + 10% FBS中培养的贴壁293T/17细胞(D)生产腺相关病毒2型(AAV2)。用收集的病毒转导HT ® 1080细胞，转导48h后用Guava easyCyte™ 5HT流式细胞仪检测GFP表达情况。慢病毒和AAV的功能滴度都是根据GFP阳性细胞少于20%的病毒稀释度计算的。 |
TransIT-VirusGEN SELECT在悬浮和贴壁细胞培养系统中优于25 kDa线性PEI和PEIpro 转染试剂
| 品牌 | 产品编号 | 产品名称 | 规格 |
| Mirusbio | MIR 6700 | TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent | 1.5 ml |
| Mirusbio | MIR 6703 | 0.3 ml | |
| Mirusbio | MIR 6704 | 0.75 ml | |
| Mirusbio |
MIR 6705 |
5x1.5 ml | |
| Mirusbio | MIR 6706 | 10x1.5 ml | |
| Mirusbio | MIR 6730 | TransIT-VirusGEN® SELECT Transfection Reagent | 30 ml |
美国品牌Cellbiolabs可提供一系列用于病毒表达、病毒包装、病毒浓缩和纯化、病毒滴度检测的研究工具。
病毒纯化试剂盒
| 品牌 |
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 产品特点 |
| Cell Biolabs | VPK-5112 | PureVirus™ Adenovirus Purification Kit | 10 preps | 操作时间小于2小时，无需超速离心，回收率>60%~70% |
| Cell Biolabs | VPK-099 | ViraBind™ Adenovirus Miniprep Kit | 10 preps | 使用特殊离心柱，操作时间小于2小时，回收率>90% |
| Cell Biolabs | VPK-140 | ViraBind™ AAV Purification Kit | 10 preps |
用于纯化AAV-2与AAV-DJ，3小时内获得纯度>95%的AAV病毒 |
| Cell Biolabs | VPK-140-T | 2 preps | ||
| Cell Biolabs | VPK-141 | ViraBind™ AAV Purification Mega Kit | 2 preps | 用于纯化AAV-2与AAV-D，J 3小时内获得纯度>95%的AAV病毒，回收率>60% |
| Cell Biolabs | VPK-141-5 | 10 preps |
病毒滴度检测试剂盒
| 品牌 | 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 产品特点 |
| Cell Biolabs |
VPK-107 VPK-107-5 VPK-107-T
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QuickTiter™ Lentivirus Titer Kit (Lentivirus-Associated p24 ELISA) |
96 assays 5x96 assays 32 assays |
**技术将慢病毒相关p24蛋白与游离p24蛋白分开，避免传统方法检测总P24蛋白导致的误差 |
| Cell Biolabs | VPK-112 | QuickTiter™ Lentivirus Quantitation Kit | 20 assays |
快速定量，操作过程45~60分钟 可检测纯化前或纯化后病毒核酸浓度 |
| Cell Biolabs | VPK-120 | QuickTiter™ Retrovirus Quantitation Kit | 20 assays |
快速定量，操作过程45~60分钟 可检测纯化前或纯化后病毒核酸浓度来定量病毒滴度
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| Cell Biolabs | VPK-110 | QuickTiter™ Adenovirus Titer ELISA Kit | 2x96 assays | ELISA方法，无需空斑形成实验，避免复杂的铺琼
脂步骤，操作更简便，耗时更短 |
| Cell Biolabs | VPK-109
VPK-109-T |
QuickTiter™ Adenovirus Titer Immunoassay Kit |
100 assays 20 assays |
免疫细胞化学方法，无需空斑形成实验，避免复
杂的铺琼脂步骤，操作更简便，耗时更短 |
| Cell Biolabs | VPK-106 | QuickTiter™ Adenovirus Quantitation Kit | 20 assays |
快速定量，操作过程45~60分钟 可检测纯化前或纯化后病毒核酸浓度来定量病毒滴度 |
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