物基因型快速鉴定试剂盒，即Rapid Plant Genotyping Assay Kit植物样品直接PCR预混液(2X)，提供了一种使用特别便捷的all-in-one的2倍浓度的检测试剂，加入一小块植物叶片等柔嫩的组织和适量的引物和水，就可以直接进行PCR扩增，后续直接电泳观察结果就可以判断植物的基因型了。本产品不仅可以用于植物的基因型鉴定，也可以用于其它适当用途的植物样品的直接PCR检测，可以轻松完成长度达到5kb的DN**段的扩增。

本试剂盒提供了可专门用于植物样品的2倍浓度的PCR预混液，并且PCR结束后可以直接上样电泳无需添加上样缓冲液。本产品含有耐叶绿素的PlantTaq™ DNA聚合酶，这是一种经过基因工程改造的非常高效的适用于植物样品直接PCR检测的耐热DNA聚合酶。

对于植物叶片等柔嫩样品可以直接PCR检测，无须提取DNA。本产品对玉米、丝瓜、甜椒、豆角、黄豆、辣椒、黄瓜、茄子、番茄等植物样品中的叶绿素、多糖、多酚等各种PCR抑制剂表现出超强的抗性，对于新鲜采集的、4℃保存或低温冻存的这些植物的叶片、嫩种子等，都无需进行DNA提取纯化，可以直接用于PCR扩增目的DNA。

所需样品少，耐受能力高。本产品用于20μl的PCR扩增体系时，通常仅加入0.1-1mm直径叶片即可顺利完成PCR检测。

本产品提供了一对阳性对照引物，便于确认PCR检测效果。该对引物是多种植物的通用引物，可以扩增多数植物叶绿体中高度保守的IRB18基因的297bp DN**段。

本产品用于植物叶片检测的效果参考图1。图中可见，本产品对多种常见植物叶片都有很好的PCR扩增效果。

图1. 植物基因型快速鉴定试剂盒检测图中所示不同植物叶片中目的基因的实测效果图。使用植物基因型快速鉴定试剂盒中提供的Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X)和Control primer mix，在PCR体系中直接加入不同植物叶片，用于扩增IRB18基因的297bp DN**段后的电泳效果图。M, DNA marker ；1, 豆角(Cowpea)；2, 黄豆(Soybean)；3, 丝瓜(Sponge gourd)；4, 甜椒(Capsicum)；5, 玉米(Maize)；6, 黄瓜(Cucumber)；7, 辣椒(Pepper)；8, 茄子(Eggplant)；9, 番茄(Tomato)。

本产品扩增不同长度目的基因的效果参考图2。图中可见，本产品以番茄叶为模板可直接PCR扩增出长达5kb的DN**段。

图2. 植物基因型快速鉴定试剂盒直接以番茄叶片为模板扩增不同长度的目的基因的效果图。M, DNA marker; 1, IRB18(297bp)；2, actin(693bp)；3, rbcL(1201bp)；4, rpoC2(2069bp)；5, rpoC2(3079bp)；6, rpoC2(3942bp)；7, rpoC2(5000bp)。

本产品扩增获得的PCR产物带有3'-dA overhangs的粘性末端，可直接用于和T载体连接进行TA克隆。

用途：植物叶片等比较柔嫩的组织样品基因组DNA中目的基因的直接扩增、基因分型(如基因缺失等)，以及基因敲除或转基因植物基因型分析。

失活或抑制：酚氯仿抽提可以使Easy-Load™ Plant Direct PCR Master Mix (2X)中含有的PlantTaq™ DNA Polymerase失活。

本产品如果用于50微升的PCR反应体系，两种包装的本产品分别足够用于40个和200个反应；如果用于20微升的PCR反应体系，两种包装的本产品分别足够用于100个和500个反应。

-20℃保存。适当避免反复冻融。

由于PCR反应非常灵敏，在使用本产品时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。

设置PCR反应体系时，20μl和50μl PCR体系中植物样品的推荐用量分别为0.1-1mm和0.3-3mm直径叶片或类似大小其它比较柔嫩的植物组织，可以直接添加到PCR体系中，无需进行任何额外处理。经测试本产品适用于柔嫩新鲜种子的直接PCR，但不适用于干硬种子的直接PCR。

PCR反应结束之后，酌情3000-5000g离心3-5min以沉淀植物组织碎片，便于吸取上清用于电泳分析等。

需自备Nuclease-Free Water。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。